特种蛋白检测助力肾脏疾病早期诊断

• 特种蛋白检测助力肾脏疾病早期诊断
  
  

  

   

  陈兴明，高娇，董瑾，于鹏，李甜，敬华，解放军306医院，检验科

  肾脏是人体的重要排泄器官，其主要功能为排泄水分、代谢产物、废物，保留有用物质；调节水分和渗透压；调节电解质及酸碱平衡；生成某些重要的生理活性物质。但几年来，肾脏疾病的发病率和流行率正在上升。慢性肾病（CKD）是全球性的公共卫生问题。有关资料显示，国际上普通人群CKD的患病率为10%～16%。中国城市的CKD患病率10.3%～12.1%。在上海社区的一项调查中，CKD患病率为11.8%，但知晓率仅8.2%。及早发现肾脏损伤情况显得尤为重要。306医院检验科引进西门子公司的特种蛋白分析仪开展多项尿液检测，为临床医生及时提供线索，助力肾脏疾病的早期诊断和精准治疗。

  

  1、尿白蛋白（Urine Albumin， u-Alb）

  尿白蛋白是指在人体尿中出现微量白蛋白（Urine Albumin，u-Alb）。白蛋白占血浆总蛋白的60%，分子量为69 kD，由肝脏合成，是一种带有负电荷的大分子蛋白，正常情况下只有极少量的白蛋白可以通过尿液排出到体外。肾小球毛细血管基底膜具有滤过功能，膜孔直径为5.5nm。白蛋白半径为3.6nm。正常状态下白蛋白很难通过肾小球基底膜，如果肾脏因疾病或损伤而异常时，蛋白可渗漏到尿液中，特别是白蛋白。很少量的白蛋白出现在尿中叫做尿微量白蛋白，后更名为尿白蛋白，是肾脏功能变差的最早信号。慢性肾病（Chronic Kidney Disease，CKD）损伤如果通过及时治疗，仍可逆转。

  通常应用尿白蛋白指标来监测肾病的发生。尿白蛋白升高，多见于：（1）糖尿病肾病糖尿病患者由于肾小球基底膜电荷异常改变，肾小球系膜基底增厚。对白蛋白的通透性增加，糖尿病肾病早期仅肾小球滤过率增高。以后才出现白蛋白尿，血压可逐步升高。（2）高血压肾病原发性高血压患者MAU明显增高，主要与收缩压相关，可能是因肾小球压力增高，肾小球滤过屏障受损或白蛋白吸收异常引起，是中风的独立危险因素。（3）心血管疾病肾小球血管床压力增高，广泛的血管内皮功能障碍、脂代谢紊乱、凝血功能异常、炎性因子损伤等共同作用造成血管功能失调。尿白蛋白升高是心血管疾病的独立风险因子。此外还包括其他肾脏疾病、系统性红斑狼疮以及类风湿关节炎等。

   

  2、转铁蛋白（transferrin，TRF）

  转铁蛋白又名运铁蛋白（transferrin，TRF），是体内一种金属结合蛋白，分子量约77 kDa的单链糖蛋白，含糖量约6%，由肝细胞及单核吞噬细胞系统合成，半衰期为7天，分布于各种组织及体液中，在电泳中TRF位于β区域，pI为5.7。

  尿液TRF在正常情况下不能通过肾小球滤过膜.早期肾损伤时肾小球基底膜内外疏松层硫酸肝素糖蛋白含量减低，使负电荷位点明显减少，使带负电荷（PI=5.7）的循环中分子蛋白TRF自肾小球滤过膜滤过，使尿液中升高可反映早期肾小球损伤，提示肾小球滤过膜电荷选择屏障受损：（1）.糖尿病肾病早期检测：转铁蛋白通过滤过膜时，受到的电荷排斥力小于白蛋白，故较更容易漏出，也更能灵敏的反应肾小球电荷屏障的受损。（2）.妊高症患者轻度肾损害检测：肾小管功能无明显受损，主要是肾小球滤过障碍，检测尿液转铁蛋白较其他指标更为敏感。（3）.老年高血压时肾损伤检测：与尿ALB、NAG等常用指标相比更早出现，且与病情严重程度正相关。（4）.新生儿/儿童肾功能检测：尿转铁蛋白是反映肾小球滤过膜屏障受损、滤过功能不全的指标，在满足早期、准确的反应肾脏损伤程度的同时，有采集标本更加方便的优势。

   

  3、免疫球蛋白G（Immunoglobulin G）

  IgG是血清免疫球蛋白的主要成分，含量最高，占血清Ig总量的75%～80%，多以单体形式存在。免疫球蛋白是机体的正常生理成分，机体保持一定水平。血清中免疫球蛋白的增多或减少则意味着免疫增殖病或免疫缺陷病。尿液IgG的检测则是肾功能恶化和预后的指标，因IgG是一种大分子蛋白，正常情况下，由于肾小球基底膜的选择性功能，不易透过。当尿中大量出现IgG等大分子蛋白时，说明肾小球基底膜已丧失选择功能。尿液中IgG可以用于诊断肾小球损伤程度，升高见于非选择性肾小球蛋白尿（肾小球疾病病晚期）。

  4、α1-微球蛋白（α1-Microglobulin, α1-MG）

  α1- 微球蛋白检测的临床意义与肾小管性蛋白尿 1-4 的鉴定有关。α1- 微球蛋白，也叫做 HC 蛋白 3 ，是一种低分子量的糖蛋白（分子量大约为 33,000），它的游离部分通过肾小球定量地滤过。正如其他通过肾小球滤过的血浆蛋白一样，重吸收和分解代谢也会在近球小管发生。如果检测出尿液中的低分子量糖蛋白，例如α1- 微球蛋白的浓度上升，可能表示发生了肾小管损伤，这种损伤在肾炎和早期糖尿病性肾病中可能出现，在与重金属接触或者服用了肾毒性药物之后会发生。如果在尿道感染患者中检测出尿液中的α1- 微球蛋白的浓度上升，表示可能与肾病有关。

  尿液α1-MG是肾近曲小管损伤的早期诊断指标，升高常见于：（1）.原发性肾脏疾病：常见肾小管功能损伤如肾小管间质病变、上尿路感染、肾性蛋白尿及血尿。（2）.高血压肾病（EH）：长期高血压会引起全身小动脉硬化 ,并以肾小动脉硬化最明显 ,导致肾实质缺血、肾小球纤维化、肾小管萎缩等缺血性肾脏损害尿α1-MG对原发性高血压肾损害有早期诊断价值。研究发现，尿α1-MG在Ⅰ期 EH时就明显升高 ,敏感性高于尿β2MG、 A1b、IgG等指标。（3）.风湿性疾病肾损伤：在SLE所致的狼疮性肾炎，原发性干燥综合征所致的肾小管酸中毒，尿α1-MG都可明显升高，早期提示肾小管重吸收功能受损。（4）.金属及药物肾毒性监测：金属中毒如镉、汞、硅等中毒可导致慢性不可逆肾损害，肾毒性药物如化疗药、麻醉剂、血管造影剂、抗生素、镇痛药等可造成肾损伤，定期检测尿a1-MG有利于预防肾毒性金属及药物使用时肾功能损害的发生和发展。（5）.其他疾病：烧伤患者测定尿α1-MG具有早期监测肾功能的价值,可作为烧伤患者常规检测项目以指导临床。

   

  5、β2 微球蛋白（Beta-2 Microglobulin, β2-MG）

  β2 - 微球蛋白作为白细胞抗原的组成成份存在于所有的有核细胞内。β2- 微球蛋白少量而持续地释放入血液，在肾脏被充分过滤，在肾小管中被重吸收并降解。因此，其在健康人血清中的浓度低而平稳，且在尿中几乎不含有β2 - 微球蛋白。肾小管损伤会导致尿中β2 - 微球蛋白的浓度升高，因此，测定尿中β2-微球蛋白的浓度是诊断和跟踪评定小管间质性肾脏损伤的好方法。

  6、视黄醇结合蛋白（Retinol Binding Protein, RBP）

  血液中RBP主要以视黄醇、前白蛋白结合的复合物形式存在，当复合物中视黄醇与靶细胞结合后，RBP便与前白蛋白分离，自肾小球滤出，由近端肾小管上皮细胞吸收、降解。近年来研究表明RBP含量改变能够敏感地反映近端肾小管功能、肝功能损害程度，是反映肾脏、肝脏及营养性疾病发展、转归的敏感指标。尿液RBP升高提示近端肾小管损伤和功能异常，有助于肾脏疾病的诊断和监测。如糖尿病肾病、高血压肾病、肾病综合征、急性肾小球肾炎、过敏性紫癜性肾炎、急性肾衰、汞中毒等疾病。由于正常人尿液中RBP含量极低，故尿液中RBP浓度降低无特殊意义。

  7、N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（NAG）

  NAG是一种细胞内溶酶体酶，以肾近曲小管含量最高。尿NAG活性变化与机体某些病理状态密切相关。主要应用于：肾小球肾炎、急性肾功能衰竭、肾病综合征、药物肾毒性检测和早期发现、肾移植后排异反应监测以及肾毒性物质带来的肾损伤监测。反映肾实质病变，尤其是急性损伤和活动期病变更敏感，主要用于早期肾损伤的监测和病情观察。

   

  8、 α2-巨球蛋白（α2-Macrogloublin, α2-MG）

  α2巨球蛋白主要由肝细胞与单核吞噬细胞系统中合成，与淋巴网状系统细胞的发育和功能密切相关。本质是一种蛋白酶抑制物，对肽链内切酶具有独特的抑制作用。它最突出特性是能与多种分子和离子结合，特别是能与很多蛋白水解酶结合而影响这些酶的活性，如与许多肽链内切酶（包括丝氨酸、巯基、羧基蛋白水解酶和一些金属蛋白水解酶）的结合。α2-MG与蛋白水解酶相互作用可使α2MG的分子构象发生变化，当酶处于复合物状态时，酶的活性部位没有失活，但不容易作用于大分子底物，若底物为分子量小的蛋白质，即使有其它抗蛋白酶的存在，也能被α2-MG-蛋白酶复合物所催化而水解。这样，α2-MG起到有选择地保护某些蛋白酶活性的作用，这在免疫反应中具有重要意义。α2- 巨球蛋白的检测对肾病综合征的鉴别诊断极为重要。因此，α2- 巨球蛋白 / 白蛋白比率的升高常常指示着肾后性血尿。

   

  9. 免疫球蛋白κ、λ型轻链（Immunoglobulin light chain κ、λ type）

  由于完整的免疫球蛋白分子无法通过完整的肾小球滤过屏障，而游离免疫球蛋白/轻链会通过肾小球滤过，并在肾小管中被重吸收。当血液中的游离免疫球蛋白/轻链浓度超过了肾小管的重吸收能力，会导致在尿液中排出游离轻链。所以检测尿液中的游离免疫球蛋白/轻链（本周蛋白）是判断是否患有单克隆丙种球蛋白病的重要依据，并可用于该疾病的诊断和监控。

  轻链升高见于：（1）多发性骨髓瘤：由于瘤细胞的单克隆性及轻链、重链合成与分泌的紊乱，血浆中往往存在大量单克隆性游离轻链（FLC），导致κ或λ链的升高及比值异常。（2）慢性淋巴细胞性白血病：属于B细胞肿瘤，存在免疫球蛋白异常，可导致κ或/和λ链升高，κ/λ比值可异常。（3）巨球蛋白血症。（4）轻链病/轻链沉积病：浆细胞异常增生，产生过多轻链，而重链合成相应减少。80%的轻链沉积患者致病轻链为κ链，而淀粉样变性则以λ链为主。（5）恶性肿瘤：肝癌患者κ和λ值可明显升高，原因可能在于肝内隐蔽抗原的释放、病毒持续感染、癌细胞抗原刺激作用、由于抑制性T细胞的缺陷，B细胞失去控制而合成抗体增多。